A – Các ứng dụng của Kháng thể và cách lựa chọn Kháng thể phù hợp
Description
🧪 Ứng dụng của kháng thể trong nghiên cứu và chẩn đoán (Antibody Applications)
| Viết tắt | Tên đầy đủ | Mô tả & Ứng dụng | Lưu ý kỹ thuật khi chọn kháng thể |
|---|---|---|---|
| Activation | Cell Activation Assay | Dùng kháng thể để kích hoạt hoặc ức chế các thụ thể (receptor) trên bề mặt tế bào nhằm khảo sát đáp ứng miễn dịch/tín hiệu tế bào. | Ưu tiên kháng thể không gắn nhãn, tinh khiết (azide-free) để không ảnh hưởng hoạt tính sinh học. |
| Depletion | Cell/Protein Depletion | Loại bỏ chọn lọc một quần thể tế bào (VD: T cell depletion) hoặc protein khỏi mẫu bằng kháng thể. | Dùng IgG nguyên vẹn/kháng thể gắn hạt từ hay Protein A/G để tăng hiệu suất tách; kiểm soát phản ứng chéo. |
| ELISA | Enzyme-Linked Immunosorbent Assay | Định lượng kháng nguyên/kháng thể trong mẫu dịch (huyết thanh, dịch nuôi cấy) theo dạng direct/indirect/sandwich/competitive. | Chọn đúng cặp capture–detection; tránh cross-reactivity; tối ưu đệm block & rửa để giảm nền. |
| ELISPOT | Enzyme-Linked ImmunoSpot | Đếm số lượng tế bào tiết cytokine ở mức đơn bào (IFN-γ, IL-2…); đánh giá miễn dịch tế bào. | Cần kháng thể ái lực cao, nền thấp và đã xác thực cho ELISPOT; kiểm soát thời gian ủ để tránh spot “nổ”. |
| FCM | Flow Cytometry (FACS) | Định lượng/phan loại tế bào dựa trên protein bề mặt hoặc nội bào bằng huỳnh quang ở mức tế bào đơn. | Dùng kháng thể conjugated (FITC/PE/APC/…); bù màu khi multiplex; cố định/permeabilize đúng khi nhuộm nội bào. |
| ICC/IF | Immunocytochemistry / Immunofluorescence | Nhuộm huỳnh quang trên tế bào nuôi cấy để xác định vị trí & mức biểu hiện protein. | Chọn fixative phù hợp (PFA hoặc methanol) với epitope; dùng kháng thể IF-validated; chú ý quang tẩy (photobleaching). |
| IHC-Fr | Immunohistochemistry – Frozen | Nhuộm mô đông lạnh (cryosection); bảo toàn epitope tự nhiên, tín hiệu mạnh. | Thường không cần HIER; xử lý lạnh chuẩn, tránh tan băng nhiều lần; kháng thể tương thích IHC-Fr. |
| IHC-P | Immunohistochemistry – Paraffin (FFPE) | Nhuộm mô cố định formalin, đúc paraffin (FFPE) để xác định vị trí/mức biểu hiện protein trong mô bệnh học. | Bắt buộc phục hồi kháng nguyên (HIER) đúng pH/đệm; chọn kháng thể validated for IHC-P (VD: HistoMAX™). |
| IP | Immunoprecipitation / Co-IP | Kéo xuống protein mục tiêu và/hoặc phức hợp tương tác để phân tích bằng WB/MS. | Kháng thể ái lực cao, ít phản ứng chéo; tránh heavy chain trùng kích thước protein đích; cân nhắc dùng light-chain specific secondary. |
| Multiplexing | Multiplex Immunoassays | Đo nhiều protein cùng lúc (VD: cytokine panel – Luminex/MSD) từ một mẫu duy nhất. | Chọn kháng thể đặc hiệu cao, không chéo; bảo đảm fluorophore/biotin không trùng phổ; chuẩn hóa đường cong chuẩn. |
| Purification | Affinity Purification | Tinh sạch protein/kháng thể bằng sắc ký ái lực (Protein A/G, antigen-affinity); tách phân đoạn IgG. | Dùng kháng thể unconjugated, azide-free; tối ưu pH rửa/giải ly; kiểm tra khả năng tái sinh cột. |
| WB | Western Blot | Phát hiện/định lượng protein đặc hiệu sau SDS-PAGE và chuyển màng; epitope ở trạng thái biến tính. | Chọn kháng thể đã validated for WB; tối ưu nồng độ, block (BSA/casein) và điều kiện rửa để giảm nền. |
Be the first to review “A – Các ứng dụng của Kháng thể và cách lựa chọn Kháng thể phù hợp”
Reviews
There are no reviews yet.